EliSpot

Las infecciones por Borrelia no solo activan una respuesta inmune humoral a través de la creación de anticuerpos, también activan una respuesta de los linfocitos T. Una vez que la infección por Borrelia burgdorferi ya no está activa, la respuesta inmune de las células T debería desaparecer.

No es posible monitorizar la efectividad del tratamiento utilizando los anticuerpos contra la Borrelia ya que pueden permanecer elevados en la sangre durante años. Y las infecciones recientes por Borrelia burgdorferi (ej. eritema de “ojo de buey” o “fiebre de verano”) no desarrollan anticuerpos hasta pasadas varias semanas después de la infección o incluso, a veces, no los desarrollan en absoluto.

El EliSpot de Borrelia puede eliminar alguno de estos problemas:

  • El análisis refleja la actividad real de la Borrelia burgdorferi en infecciones crónicas y recientes.
  • El EliSpot es altamente sensible y puede detectar incluso una única célula T reaccionando contra la Borrelia burgdorferi. Con niveles de detección que pueden ser tan bajos como una célula en cada 100.000, el EliSpot es uno de los análisis a nivel celular mas sensibles que existen.
  • El EliSpot es entre 20 y 200 veces mas sensible que el clásico test ELISA.
  • El EliSpot tiene una sensibilidad similar al análisis de PCR en tiempo real, pero detecta la proteína secretada en lugar del mRNA (RNA mensajero).
  • El EliSpot puede ser útil a la hora de monitorizar los tratamientos. Normalmente debería ser negativo de 4 a 8 semanas después de haber acabado un tratamiento efectivo.

Reacciones positivas en el EliSpot demuestran infecciones activas contra:

Dr. Leo Joosten, Departamento de medicina, Universidad de Radboud, Nijmegen, Holanda:

“¿Cuál de las soluciones que se están estudiando hoy en día cree Ud. que supone la mayor promesa para que en un futuro se pueda diagnosticar la enfermedad de Lyme con precisión y fiabilidad? ¿Cuáles de los análisis disponibles hoy en día para el público en general, a parte del Western Blot, cree Ud. que proporcionan un mayor nivel de fiabilidad?”
“Por el momento existen análisis basados en la respuesta celular; el LTT y el EliSpot son algunos de ellos. Estos análisis nos aportan información acerca de la respuesta celular inmune contra los antígenos de la Borrelia y parece ser que en un futuro, además de los análisis serológicos, se empezarán a utilizar más.”


Borrelia EliSpot (T-Cell-Spot / IGRA: Interferon-Gamma-Release Assay)

Antígenos Borrelia EliSpot:

  • Borrelia burgdorferi Fully Antigen: Borrelia burgdorferi B31-banda de referencia (Borrelia burgdorferi sensu stricto)
  • Borrelia burgorferi Peptide-Mix: OspA de Borrelia b. sensu stricto, Borrelia afzelii, Borrelia garinii + OspC nativo + DbpA recombinante
  • Borrelia burgdorferi LFA-1 (Antígeno 1 asociado a la función del linfocito): Proteína del propio cuerpo + Borrelia burgdorferi sensu stricto (epítope compartido). A menudo asociadas con enfermedades autoinmunes: colagenosis, Artritis Reumatoide, vasculitis (ANA, CCP-anticuerpos, ANCA)
    Explicación: nativo = cultivo de antígenos / recombinante: producción de tecnología genética

Reflejando la actividad real de las células T en la enfermedad de Lyme:

  • Indicio de una infección activa por Borrelia burgdoferi en los casos en los que el Elispot sigue estando positivo después de haber acabado el tratamiento
  • T-Cell-Spot/IGRA fue aprobado por la FDA en Mayo del 2011 para Mycobacterium tuberculosis:
    "… Un resultado positivo sugiere que una infección es probable, un resultado negativo sugiere que la infección es improbable …”
    “…Los resultados pueden estar disponibles en 24 horas…”

EliSpot: Nuevo análisis de las Células T que supone una revolución para la enfermedad de Lyme:
… Se estima que la sensibilidad del test EliSpot es de un 84% y la especificidad de un 94%...
… Los ensayos de EliSpot proporcionan pruebas sólidas y con una alta reproducibilidad de los datos…
… El EliSpot puede analizarse de nuevo para obtener más información en los ensayos de seguimiento…
… los dos ensayos (EliSpot y el recuento de células CD57) se complementan entre ellos para lograr entender la inmunidad mediada de las células T en vivo…

Lehman PV et al.: Unique Strengths of EliSpot for T Cell Diagnostics in: Kalyuzhny AE. Handbook of EliSpot: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology, Vol. 792. 2nd Ed: Springer; 2012: 3-23