i-SPOT

La función principal de las células T es estimular las células B proporcionando citoquinas específicas y no específicas como la IFN-g y la IL2.

Un antígeno es una sustancia (normalmente extraña) que reacciona a un anticuerpo y puede inducir una respuesta inmunitaria. Una estructura grande como una proteína, un virus o una bacteria, contiene muchas subregiones que son los determinantes antigénicos o epítopos reales. Estos epítopos pueden consistir en péptidos, carbohidratos o lípidos particulares con un tamaño y una configuración tridimensional correcta para ocupar el lugar de unión de una molécula de anticuerpo o de un receptor de células T. Entonces, cuando el antígeno entra en el cuerpo, se conecta a la molécula de anticuerpo y a un receptor de células T (los virus se conectan más fuertemente a las moléculas de anticuerpos y las bacterias a los receptores de células T) y las células T estimulan a las células B proporcionando citoquinas específicas y no específicas.

El iSpot Assay (ensayo de inmuno-Spot ligado a enzimas) es capaz de detectar respuestas de las células T a nivel de células individuales y, por lo tanto, muestra la respuesta inmunitaria de los individuos analizados. La información sobre las citoquinas secretadas por las células T al ser estimuladas con antígenos específicos, proporciona una imagen diferenciada de la respuesta inmune del paciente para realizar un seguimiento de la progresión de la enfermedad y determinar la inmunidad celular tras la infección.

El análisis iSpot se basa en la variabilidad en relación con el número de células T activadas y, respectivamente, las IFN-g y las IL2 secretadas.
La IL-2 es una citoquina de 15,5 kDa que secretan las células T que han sido activadas por un antígeno. En un principio se la consideraba como un factor de crecimiento de las células T pero ahora se sabe que la IL-2 tiene una amplia gama de acciones, incluida la capacidad de aumentar la actividad citolítica de las NK o de las células asesinas activadas por linfoquinas, aumentar la actividad citolítica de linfocitos infiltrantes de tumor (TIL), aumentar la producción de inmunoglobulina por las células B activadas, mantener la proliferación homeostática de las células T reguladoras, actuar sobre las células linfoides innatas y modular la diferenciación de las células T efectoras, además de influir en las células T de memoria, las células T efectoras y los monocitos. En general, la IL-2 representa la función de memoria del sistema inmunológico y por lo tanto el periodo de convalecencia.

IFN-γ se ha manifestado como una citocina extremadamente versátil que puede llevar a cabo innumerables actividades biológicas que no son redundantes con otros interferones. El IFN-γ se asocia con una infección aguda o activa. La literatura está inundada de informes que enfatizan su importancia en las enfermedades. Por consiguiente, cualquier fallo en el sistema de IFN-γ-IFN-γR dificulta seriamente la respuesta inmunológica del huésped a las infecciones. Por lo tanto, es indiscutible su relevancia a la hora de proporcionar una inmunidad protectora contra cánceres y enfermedades infecciosas. Los patógenos han desarrollado numerosas estrategias evasivas para hacer frente a sus efectos de freno y eludir la protección conferida por la IFN-γ. El IFN-γ se asocia con una infección aguda o activa, mientras que la IL-2 representa la función de memoria del sistema inmunitario y, por lo tanto, representa convalecencia.

La relación entre la respuesta de IFN-γ y la IL-2 permite obtener una visión clara sobre el estado inmunológico del paciente durante y después de la infección. Por lo tanto, el análisis EliSpot de 2 colores iSpot es una solución universal para determinar el estado inmunitario tanto en pacientes con infecciones activas como en pacientes con infecciones que hayan estado presentes durante un período de tiempo más prolongado.

La técnica de Ensayo Inmuno-Spot Ligado a Enzimas promete ser un nuevo referente con diferentes aplicaciones en el campo de las enfermedades infecciosas, en cuestiones relacionadas con la autoinmunidad, en diagnósticos de trasplantes, en alergias (seguimiento del tratamiento) y en estudios sobre vacunas.

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Son muchas las infecciones que se pueden detectar con este test:

  • Borrelia burgdorferi
  • Borrelia miyamotoi
  • Anaplasma / Ehrlichia
  • Bartonella henselae
  • Babesia microti
  • Chlamydiophila pneumoniae
  • Chlamydia trachomatis
  • Mycoplasma pneumoniae
  • Yersinia
  • Rickettsia
  • Virus del herpes simple (HSV 1/2)
  • Virus de la varicela zoster (VZV)

Referencias:

Mitra S, Leonard WJ. Biology of IL-2 and its therapeutic modulation: Mechanisms and strategies. J Leukoc Biol. 2018 Apr;103(4):643-655. doi: 10.1002/JLB.2RI0717-278R. Epub 2018 Mar 9. PMID: 29522246.
Kak, Gunjan, Raza, Mohsin and Tiwari, Brijendra K. "Interferon-gamma (IFN-γ): Exploring its implications in infectious diseases" Biomolecular Concepts, vol. 9, no. 1, 2018, pp. 64-79.
Janetzki, S., M. Rueger, and T. Dillenbeck, Stepping up ELISpot: Multi-Level Analysis in FluoroSpot Assays. Cells, 2014. 3(4): p. 1102-15.